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豬藍耳病毒抗體快速金標檢測卡
使用說明書
原理:豬藍耳病毒抗體檢測試劑盒(膠體金法),系采用國際先進的膠體金免疫層析技術(shù)檢測樣本(全血、血清、血漿)中抗豬藍耳病毒抗體的方法。整個試驗只需20分鐘,操作簡便、快速、準確,靈敏度高、結(jié)果直觀、容易判定。本試劑盒內(nèi)還設(shè)計一張“金邊試紙與ELISA試驗實物參照物”,用試紙檢測線的顏色與實物參照圖對照,便可粗略估計樣品中的抗體滴度。
操作方法:1、在檢測卡的加樣孔內(nèi)加入2滴(100ul)待檢血清或樣品。
2、將檢測卡平放于桌面上,在室溫下靜置20分鐘內(nèi)判定結(jié)果。超過20分鐘的結(jié)果只能作為參考。
結(jié)果判定:
1、陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線。豬藍耳抗體滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
2、弱陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線。但檢測線(T)顏色很淺。
3、陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
4、失效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)和檢測線區(qū)(T)都無明顯條帶出現(xiàn);或僅檢測線區(qū)(T)出現(xiàn)色線。
診斷參考:1、結(jié)果該豬未接種過豬藍耳病毒疫苗:
a)當被檢樣品檢測線(T)處無明顯色帶出現(xiàn),說明被檢測樣品中沒有豬藍耳病毒抗體。如果豬群健康,應(yīng)當及時進行豬藍耳病毒疫苗接種。
b) 當被檢樣品檢測線(T)處無明顯色帶出現(xiàn),則該豬有可能為野毒感染,應(yīng)進一步觀察驗證。
2、如果該豬已接種過豬藍耳病毒疫苗:
c)當被檢樣品檢測線(T)條帶的色澤≥對照卡中1:40效價時,說明豬藍耳病毒抗體的滴度較高,已達到抵御強毒攻擊的保護水平。
d)當被檢樣品檢測線(T)條帶的色澤<對照卡中1:40效價時,說明豬藍耳病毒抗體效價未達到抵御豬藍耳病毒強毒攻擊的低保護滴度,建議進行疫苗補種。
注意事項:鋁箔打開后,檢測卡應(yīng)盡快使用;受潮后檢測卡將失效。常溫保存,保質(zhì)期18個月。
特點:敏感:陽性檢出率達到98%
特異:不與其它常見豬病如豬藍耳、偽狂犬、細小病毒發(fā)生交叉反應(yīng),特異性97%;
方便:肉眼判斷、無需儀器、操作簡單;
快速:20分鐘即可以出結(jié)果,有利于疫情的快速鑒別和免疫水平監(jiān)測;
用途:適合于各級防檢部門、豬場、獸醫(yī)站廣泛使用。
金標層析卡使用注意事項
測試前準備
1.如發(fā)現(xiàn)過期或鋁箔袋破損的產(chǎn)品,均不可使用。
2、本產(chǎn)品室溫陰涼保存即可(低于30℃)。如冷藏保存,需先將檢測卡平衡至室溫,再打開鋁箔袋使用,防止層析膜吸潮。檢測卡從鋁箔袋中取出后,應(yīng)盡快使用。
3、請不要接觸檢測卡上“加樣孔”和“觀察窗”處的層析膜。
樣本準備
4、為檢出效果,盡量采用新鮮、無污染的樣本。如樣本有大量血脂,會干擾檢測,對此,應(yīng)離心處理后,避開油脂層取血清部分檢測。當或血清異常粘稠或不足時可用生理鹽水適當稀釋后檢測,標本的終效價應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
5、采集的血清樣本如不能立即檢測,短期存放(48小時)需置于4℃,長期保存請置于-20℃以下。
6、未加抗凝劑的全血樣本應(yīng)立即進行檢測;如已發(fā)生部分凝血,請分離血清進行檢測。加抗凝劑的全血標本請于24小時內(nèi)進行檢測,且勿冷凍;凍融會使紅細胞破裂溶血,嚴重影響檢測效果。
測試反應(yīng)
7、滴加樣本時,請將吸管前端與加樣孔保持1厘米左右距離,以能準確加樣;如距離過近,可造成液滴體積減小或因滴數(shù)判斷誤差而造成加入樣本量不準,均影響測試效果。
8、樣本加入“加樣孔”時,應(yīng)避免泡沫產(chǎn)生。加樣量需控制在100ul左右(約兩滴樣本)。過量樣本加入不會提高檢測敏感度。特別是,過量的全血樣本會使紅細胞淤積在“顯示孔”部位,導(dǎo)致層析膜紅色本底過深,嚴重影響結(jié)果判斷。
結(jié)果判斷
9、本類產(chǎn)品主要用于豬只樣品的檢測,能否用于其它動物,目前尚未評價。
10、抗體水平的高低只與檢測線(T線)的深淺有關(guān),與質(zhì)控線(C線)的深淺無相關(guān)性。質(zhì)控線只要清晰可見,就表示實驗有效。
特別提示:必須依據(jù)各地相關(guān)規(guī)定對用過的檢測卡及樣本作為污染物,妥善處理。